为什么要进行核酸检测?
新型病毒肺炎感染后会在患者体内复制和扩增,在侵袭的组织和器官内会存在一定量的*,同时被感染者会由于生活、工作等原因在其接触的食物、空气、水体、物体表面留下*。
因此可以从人体部位、食品、空气、水体及物体表面采集标本,通过特定的方法检测其中是否存在新型病毒肺炎核酸以及核酸含量的高低来和评估毒感染其是否被病毒感染的程度及其环境污染的状况。特别是对一些新型携带者(新型病毒肺炎核酸检测阳性但无明显临床和影像学表现,且血清特异性新型病毒肺炎抗体阴性者),核酸检测是确诊新型病毒肺炎感染的金标准。
另外,当前我*控的,已从对本土病例的防控转变为对境外输入性病例的防控以及冷链运输进口物品携带污染及密切接触人群的监测,因此,新型病毒肺炎核酸检测成为了我*控的重要手段。
问
新型病毒肺炎核酸检测的方法主要有哪些?
目前国家药品监督管理局(National Medical Pro- ducts Administration,NMPA)批准上市的新型病毒肺炎核酸检测试剂盒所采用的检测方法主要有实时荧光 PCR法、恒温扩增法、联合探针锚定聚合测序法、杂交捕获荧光法、RNA 捕获探针法、RNA 恒温扩增捕获—金探针层析法、双扩增法以及基于下一代测序技术(next-genera-tion sequencing,NGS)的新型病毒肺炎核酸检测方法等。
实时荧光PCR 法是目前开展新型病毒肺炎核酸检测主要的方法,灵敏快速,其检测下限为10~10³copies/mL,部分产品可达10 copies/mL。该方法检测耗时存在差异,通常两步法约需3~3.5h,一步法可缩短至1h 以内。
恒温扩增实时荧光法是将恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合,可将新型病毒肺炎核酸检测全流程时间缩短至1.5h 以内。恒温扩增芯片法是将恒温扩增技术与微流控芯片技术相结合,其特点是可在同一份样本中同时检测多种病原体。恒温扩增法具有集成能力强、自动化程度高、检测时间短、检测下限低(可达 10²copies/mL) 等特点。基于下一代测序技术(NGS)的新型病毒肺炎核酸检测不依赖传统的微生物培养,具有高通量、一次可检测多个靶基因的特点,可发现新发病原体、监测病原体变异,为诊断试剂、药物等研发和应用提供依据。
在此次初期,利用NGS从临床样本中成功鉴定出了新型病毒肺炎的基因组序列,为新型病毒肺炎的早期发现和诊断提供了重要依据。但目前NGS成本较高、平台不通用、缺乏统一的实验室操作规范和评价标准,因此主要用于科研,其临床大规模应用需进一步标准化和规范化。
问
为什么核酸检测会出现jia阳性和jia阴性?
虽然核酸检测是新病毒肺炎病原学诊断的金标准,但仍存在一定的局限性。当临床高度怀疑新型病毒肺炎感染而核酸检测阴性时,需结合患者肺部 CT、 新型病毒肺炎特异性抗体、血常规等其他检测结果进行综合判断。
假阳性结果多由实验室污染或操作不当造成。假阴性结果主要原因∶(1)感染的不同时期,新型病毒肺炎
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